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干涸組織的補(bǔ)救辦法

時(shí)間：2020-09-27 17:16

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由于機(jī)器故障等各種原因?qū)е陆M織在脫水過程中長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中，引起組織干涸發(fā)硬。解決方法：組織干涸導(dǎo)致組織

內(nèi)水分減少時(shí)一般采取95%乙醇和無水乙醇短時(shí)間處理（各半小時(shí)），防止組織進(jìn)一步硬化，然后用二甲苯透明，常規(guī)浸蠟（可適

當(dāng)延長(zhǎng)透明、浸蠟時(shí)間）。也可以用30%丙三醇水溶液里浸泡幾小時(shí)后洗干凈再脫水、透明、浸蠟。組織干涸后最大的問題是細(xì)胞

核無法上色，這在組織處理不佳時(shí)也同樣存在，導(dǎo)致切片無法診斷。筆者通過長(zhǎng)期的實(shí)踐，發(fā)現(xiàn)用EDTA 或EGTA 溶液煮沸20 分鐘

（高壓鍋隔水加熱，帶帽出氣后3 分鐘）可以解決部分問題。也可將組織切片脫蠟至水后放入丙酮內(nèi)處理5-10分鐘（或60℃5-6分

鐘）。對(duì)于由于組織脫水不佳、組織干涸引起細(xì)胞核不能著色，用1%二氯化鈷染色法可能會(huì)有所改善。

Dingwei's 1%二氯化鈷染色法：

（1）切片脫蠟至水后，在1%二氯化鈷溶液內(nèi)浸泡過夜（高壓鍋內(nèi)隔水加熱，帶帽出氣后3 分鐘也可以達(dá)到同樣的效果，但氯化鈷

氣體可能有一定的毒性，如非十分緊急，不要使用）。

（2）水洗。

（3）蘇木素染色5-10分鐘，水洗。

（4）1%鹽酸乙醇分化。

（5）水洗。

（6）流水藍(lán)化。

（7）伊紅染色（經(jīng)1%二氯化鈷溶液處理后，胞漿略有蘇木精非特異性著色，伊紅不容易著色，故染色時(shí)間要延長(zhǎng)）。

（8）梯度乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。

結(jié)果：無法著色的細(xì)胞核顏色加深。但是，此染色僅僅是核染色的加深，已經(jīng)變性的細(xì)胞膜、染色質(zhì)顆粒均無法復(fù)原。