近年來隨著對提高宮頸癌篩查質(zhì)量和擴大篩查人群的關(guān)注，細(xì)胞學(xué)新技術(shù)發(fā)展迅速，液基細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)及診斷報告方式的出現(xiàn)使浸潤性宮頸癌發(fā)病率較過去明顯降低，但TCT的假陰性、假陽性診斷仍然客觀存在，而搞好質(zhì)量控制是有效降低TCT假陽性和假陰性的前提，就如何搞好TCT的質(zhì)量控制從標(biāo)本制片、染色及診斷等方面做個講解。

1.標(biāo)本制片：

（1）標(biāo)本采集：

明顯地影響診斷的準(zhǔn)確性，因此標(biāo)本采集必須取到足夠量的細(xì)胞數(shù)，并且各類標(biāo)本中應(yīng)出現(xiàn)有效細(xì)胞成分。涂片內(nèi)可供診斷的細(xì)胞太少或紅細(xì)胞太多等因素均可造成假陰性結(jié)果。標(biāo)本采集應(yīng)在直視下進行，應(yīng)采集到病變部位和宮頸的移行區(qū) （鱗柱交界區(qū)）細(xì)胞，該區(qū)是絕大多數(shù)宮頸癌起源的部位。TCT標(biāo)本取樣要保證宮頸刷的尖端部位有一定的壓力，宮頸刷的尖端放入宮頸內(nèi)，兩邊緊貼頸管的外口，以取得足夠的細(xì)胞成分。涂片中除鱗狀上皮細(xì)胞外，必須見到柱狀上皮細(xì)胞或化生的鱗狀上皮細(xì)胞。另外，標(biāo)本采集時，應(yīng)盡量避免干擾物 （如血液、黏液等）混入。取材應(yīng)避開月經(jīng)期，取材前24小時不上藥，不沖洗，不過性生活。分泌物較多的時候可在取材前用棉簽輕輕沾去，不可用力擦。

（2）標(biāo)本制備：

TCT制片時細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)程序化處理，使黏液、血細(xì)胞和炎性細(xì)胞與上皮細(xì)胞分離，制片薄且分布均勻。一般取材滿意的標(biāo)本均能制出質(zhì)量較佳的細(xì)胞學(xué)涂片，但不同原理TCT制片也各存在某些缺點，如膜式法細(xì)胞分布不均，涂片中某些區(qū)域細(xì)胞缺如；沉淀法細(xì)胞多的標(biāo)本制片細(xì)胞層次太多，不同一平面上，細(xì)胞數(shù)量少的標(biāo)本同樣沉淀時間制片可造成細(xì)胞片的數(shù)量太少。因此，TCT制片也應(yīng)根據(jù)所用的原理方法認(rèn)真控制好容易產(chǎn)生制片質(zhì)量不佳的情況。

（3）標(biāo)本固定：

無論是傳統(tǒng)的巴氏涂片或TCT制片，制片完畢應(yīng)立即放入固定液內(nèi)，使細(xì)胞形態(tài)保存完好，避免涂片完全干燥造成細(xì)胞褪變，固定不佳會立即引起細(xì)胞退化，可導(dǎo)致假陰性或假陽性。TCT的細(xì)胞保存液是一種良好的防腐劑，對細(xì)胞有一定的固定作用，但仍未達(dá)到良好的固定效果，在制成薄層細(xì)胞片后，必須用標(biāo)準(zhǔn)濃度的細(xì)胞固定液固定。細(xì)胞固定液通常采用95%乙醇，乙醇固定液較好的固定濃度為90%～95%，低于90%的乙醇固定效果不好，95%以上濃度乙醇固定可造成細(xì)胞核深染。固定時應(yīng)淹沒整張細(xì)胞片。固定液還必須保持新鮮，使用過的固定液再使用前應(yīng)過濾并添加新的固定液，保持其有效濃度。

（4）標(biāo)本染色：

宮頸細(xì)胞學(xué)的常規(guī)染色方法有巴氏染色法和蘇木素-伊紅染色法等，較理想的染色方法為巴氏染色及其改良染色方法。巴氏染色包括細(xì)胞核染色分化、反藍(lán)細(xì)胞質(zhì)染色透明等步驟，其中最重要的環(huán)節(jié)是蘇木素的細(xì)胞核染色。

2.染色結(jié)果：

上皮細(xì)胞：核紫藍(lán)色，核仁紅色；胞質(zhì)角化細(xì)胞呈粉紅色，全角化呈橙黃色，角化前細(xì)胞呈淡藍(lán)色或淡綠色；白細(xì)胞：核藍(lán)紫色，胞質(zhì)淡藍(lán)或淡綠色；紅細(xì)胞鮮紅色或橙紅色：黏液淡藍(lán)或粉紅色。

3.染色失敗的補救：

巴氏染色時如遇到染色質(zhì)量不佳或涂片長期存放而褪色時，可按以下程序處理后重染：

（1）把涂片浸泡在二甲苯溶液內(nèi)，直到蓋玻片自動脫落。

（2）把涂片放入二甲苯溶液內(nèi)充分浸泡，使樹膠完全溶掉。

（3）依次放入無水乙醇和95%乙醇中，各2～5分鐘。

（4）放入蒸餾水中漂洗，直到胞質(zhì)顏色完全脫落干凈為止。

（5）放入0.5%鹽酸中至顯微鏡下觀察細(xì)胞核顏色完全褪掉。

（6）水洗10～15分鐘，然后重新染色。