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病理石蠟切片機(jī)使用技巧

時(shí)間:2024-12-02 15:49

點(diǎn)擊數(shù):12

在使用不同包埋介質(zhì)進(jìn)行切片時(shí),經(jīng)常會(huì)遇到一些相似的問(wèn)題。比如,切片厚度不均勻、切片過(guò)程跳動(dòng)或者切面不規(guī)則等,這些情況通??梢酝ㄟ^(guò)調(diào)整切片刀的角度來(lái)改善。如果發(fā)現(xiàn)切片表面出現(xiàn)波紋、劃痕或受到污染,問(wèn)題可能在于切片刀變鈍,重新打磨刀刃或更換刀片通??梢越鉀Q。若切片上出現(xiàn)垂直的細(xì)長(zhǎng)劃痕或裂紋,可能是由于刀刃有缺口或者標(biāo)本中含有硬質(zhì)異物或雜質(zhì)。若換位置切片后劃痕仍然在同一處,則可以推測(cè)是組織中有如鈣化物、砂礫或其他硬性物質(zhì),而不是刀刃的問(wèn)題。如果組織過(guò)于柔軟,往往是因?yàn)槊撍蛲该骰幚聿怀浞?,將組織重新浸泡處理后再試可能會(huì)有所改善,盡管修復(fù)后的效果可能與標(biāo)準(zhǔn)切片有所不同??偟膩?lái)說(shuō),切片過(guò)程中可能出現(xiàn)多種問(wèn)題,接下來(lái)將針對(duì)幾種常見(jiàn)的情況進(jìn)行具體說(shuō)明。

常用一次性刀片:


 

型號(hào)

刀片材質(zhì)

刀片長(zhǎng)度(mm

刀片厚度(mm

刀片寬度(mm

徠卡818

高級(jí)碳鋼

80

0.25

8

徠卡819

不銹鋼/碳鋼

80

0.25

8

羽毛R35

3CR13不銹鋼

80

0.25

8

羽毛S35

金屬

80

0.25

8

 


切片蠟帶彎曲

切片蠟帶彎曲,是由于蠟塊的上下兩邊與刀片的水平線不平行造成的(1 。切片時(shí)蠟塊要放正,保證底緣與刀片的水平線平行,不能一邊高一邊低(2) 。

 image.pngimage.png

   圖(1)              圖(2

切片出現(xiàn)空洞

 

切片中出現(xiàn)空洞(如圖3~6所示)不僅影響切片的外觀,更重要的是可導(dǎo)致病理醫(yī)生在診斷過(guò)程中遺漏重要信息。如果隨著連續(xù)深切,空洞逐漸變小,則說(shuō)明這是由于切片未完全切到而引起的操作性問(wèn)題。當(dāng)切蠟塊時(shí)施加的力量過(guò)猛過(guò)大,組織中的小塊或小點(diǎn)可能會(huì)從蠟塊中脫落,從而在切片中形成小空洞。這種現(xiàn)象在脫水、透明或浸蠟處理過(guò)度的組織中尤為常見(jiàn),特別是對(duì)于肝、脾、腎、腦、淋巴結(jié)以及子宮等組織標(biāo)本。如果取材過(guò)薄,容易導(dǎo)致處理過(guò)度,從而增加蠟塊在粗修和切片時(shí)出現(xiàn)空洞的風(fēng)險(xiǎn)。因此,取材時(shí)需要注意標(biāo)本的厚度應(yīng)適中,避免過(guò)薄。

    

如果遇到這樣的蠟塊,可以先將其在冰盤上冷卻片刻,或者用濕棉花輕輕沾濕蠟塊表面,再進(jìn)行切片時(shí)注意減輕刀刃的壓力,避免用力過(guò)猛,以減少人為空洞的發(fā)生。如果切片時(shí)發(fā)現(xiàn)蠟帶上的組織中出現(xiàn)空洞,而蠟塊中的組織仍然充足,則應(yīng)嘗試緩慢切片,直至空洞消失。此外,空洞也可能是由于浸蠟過(guò)程中蠟液中混入了空氣,尤其是在肺組織標(biāo)本中,這種問(wèn)題更為常見(jiàn)。即使連續(xù)切片,空洞也可能難以消失,需要特別注意浸蠟時(shí)的操作細(xì)節(jié)。

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3. 闌尾組織,包埋時(shí)3塊組織沒(méi)有同時(shí)埋平,不在同一水平線,切片時(shí)造成右下角的一塊組織沒(méi)有切全,形成人為穿孔的假象

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4. 蠟塊粗修時(shí)沒(méi)有完全修全,組織沒(méi)有充分暴露最大面就急于裱片,切片上形成許多不規(guī)則的空洞

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5. 組織內(nèi)含有類似蟲(chóng)卵一類的大量異物,因質(zhì)地與組織不同,故切片時(shí)蟲(chóng)卵從蠟塊中蹦出形成空洞

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圖6. 當(dāng)切蠟塊用的力太猛太重時(shí),組織中的小斑點(diǎn)、小斑塊從蠟塊中脫落,在切片上留下一個(gè)個(gè)小空洞

切片時(shí)蠟帶不能形成

這一現(xiàn)象的原因可能是因?yàn)榈短g、刀的角度太傾斜、蠟太硬(即使用的石蠟熔點(diǎn)太高)或室溫太低。蠟帶的形成是依賴于切片時(shí)蠟塊產(chǎn)生摩擦致熱而導(dǎo)致蠟片相互連接。如果刀冷,切片時(shí)不足以產(chǎn)熱,蠟片就無(wú)法相連。

切片隨著蠟塊的運(yùn)動(dòng)而運(yùn)動(dòng)

這一現(xiàn)象的原因可能是因?yàn)槭覝靥?,或蠟太軟而產(chǎn)生。如果蠟帶不能連續(xù),可以先單張切片,再用鑷子或細(xì)長(zhǎng)的竹簽沿蠟塊的底端平行牽拉,方可形成蠟帶(7) 。

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推薦使用泰維R245型 半自動(dòng)切片機(jī)

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★ 采用國(guó)際先進(jìn)的進(jìn)口步進(jìn)電機(jī)驅(qū)動(dòng),切片精度高,運(yùn)行平穩(wěn)安靜。

● 高清彩色觸摸屏中英文菜單控制切片厚度、修片厚度、切片記數(shù)及快進(jìn),快退和轉(zhuǎn)換功能。

★ 高精準(zhǔn)度的進(jìn)給系統(tǒng):25600細(xì)分?jǐn)?shù)的高精密控制器搭配高精度光電傳感系統(tǒng),確保0.1μm切片精度;

★ 雙進(jìn)樣系統(tǒng):具備機(jī)械小搖輪和電動(dòng)按鍵雙進(jìn)樣模式,更好的滿足不同操作者的使用習(xí)慣;



切片出現(xiàn)搓衣板或波紋樣改變

波紋或振顫問(wèn)題的產(chǎn)生,多數(shù)是由于蠟塊未夾緊或刀片未在切片機(jī)上擰緊所致。此外,機(jī)械部件老化或切片機(jī)松動(dòng)也是潛在原因之一。同時(shí),刀片傾斜角度過(guò)大也可能導(dǎo)致切片出現(xiàn)波紋。這種現(xiàn)象尤其常見(jiàn)于質(zhì)地較硬的組織蠟塊,例如子宮肌瘤標(biāo)本。波紋狀的震顫通??梢栽谄壑腥庋塾^察到。針對(duì)堅(jiān)硬或堅(jiān)韌的組織蠟塊,可以采用表面軟化處理來(lái)改善切片質(zhì)量,具體操作如下:

 

1. 鹽酸軟化:將蠟塊出現(xiàn)裂隙的一面朝下放入5 mol/L鹽酸溶液的容器中(可為玻璃或塑料容器),浸泡510分鐘后取出,用干紗布擦去蠟塊表面的鹽酸。

2. 切片:無(wú)需冷凍蠟塊,在室溫(約25℃)下直接使用切片機(jī)切片,切片厚度建議為4μm。

3. 漂片與裱片:將切片光面朝下放入冷水中,隨后用干凈的載玻片移入漂片儀的水槽中(溫度約為45-47℃),待切片展平后迅速裱貼在載玻片上。

4. 后續(xù)處理:按常規(guī)方法對(duì)切片進(jìn)行烘烤、染色和封固處理。

振顫或微小振動(dòng)的出現(xiàn),通常與組織處理時(shí)的脫水過(guò)度密切相關(guān)。此外,刀片過(guò)鈍、傾斜角度過(guò)大以及切片速度過(guò)快也會(huì)引發(fā)類似問(wèn)題。如果確實(shí)是由于脫水過(guò)度造成組織變硬,可以使用濕紗布或棉花蘸取少量溫水,輕輕涂抹蠟塊表面,以增加濕度。這種方法在處理淋巴結(jié)等含水量低的組織時(shí)尤為有效。如果取材過(guò)薄,經(jīng)過(guò)脫水處理后組織容易變得質(zhì)地堅(jiān)硬,切片時(shí)易出現(xiàn)振顫或微小振動(dòng),進(jìn)而損傷組織結(jié)構(gòu),影響病理醫(yī)生的診斷。

此外,密集的顫痕可能是刀片過(guò)鈍或傾斜角度不當(dāng)造成的,導(dǎo)致蠟塊在切片時(shí)不是被切割,而是被下,甚至出現(xiàn)搓衣板樣的紋路(如圖8所示)。為避免這種情況,應(yīng)確保刀片鋒利、調(diào)整刀片角度并減緩切片速度,避免用力過(guò)猛,從而提高切片質(zhì)量。

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圖8. 切片出現(xiàn)搓衣板樣改變

有時(shí),切片刀“”進(jìn)了蠟塊,會(huì)留下一道較深的印痕(9) 。這類情況多數(shù)是由于切片前蠟塊沒(méi)有夾緊,或切片刀沒(méi)有擰緊。在為了切全切深的過(guò)程中將會(huì)造成組織的浪費(fèi)。如果蠟塊或切片刀松動(dòng),切片刀就會(huì)“吃”進(jìn)蠟塊里,造成蠟塊破壞、組織損傷,切片難以完整。

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圖9. 切片刀“”進(jìn)蠟塊,留下一道較深的印痕